培养条件：气相条件为95%空气与5%二氧化碳，温度设定在37℃，使用DMEM培养基加入10%胎牛血清和1%青链霉素-青霉素溶液。A-673细胞系源自一名15岁女性的横纹肌肉瘤。这种细胞在软琼脂中能够形成克隆，并且在免疫抑制小鼠体内具有致瘤性。该细胞系具有四个以上的标志性染色体，包括一个额外的F染色体和两个异常的B染色体。传代时，建议采用1:2比例进行细胞传代。

传代过程方面，每两天更换培养液。建议同时购买，尊龙凯时(中国区)人生就是搏提供了非常优惠的细胞购买方案。收到细胞后，应先处理以确保它们处于良好的生长状态，然后再灌满完全培养液并封好瓶口，这是运输细胞的最佳方式。在收到细胞时，使用75%酒精消毒整个细胞瓶，随后在超净工作台内进行严格的无菌操作。细胞瓶需在37℃、5%CO₂的培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态后再进行后续处理。

在显微镜下观察细胞的生长情况，并拍摄不同倍数的照片进行保存（理想情况下，40x, 100x, 200x各拍摄一张）。前三天的照片是重要的售后依据，若不提供照片，则默认收到时状态良好。

细胞培养步骤如下：

a. 细胞传代

如果细胞的汇合度未超过80%，需将培养瓶内的完全培养液收集至离心管中，留5ml完全培养基，再放回37℃、5%CO₂孵箱中培养。如果细胞密度超过80%，即可进行传代。贴壁细胞的传代步骤如下：

1. 弃去培养上清，用不含钙和镁的PBS洗涤细胞1-2次。
2. 加入约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速返回操作台，轻敲培养瓶后加入5ml完全培养基以终止消化。
3. 轻轻吹打细胞使其完全脱落后吸出，再将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟，弃去上清；补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代（分到两个T25瓶中），补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃、5%CO₂细胞培养箱中培养。

b. 细胞冻存

当细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃去培养液，用PBS洗涤细胞一次；添加约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液，观察细胞回缩并圆形化后，加入5ml完全培养基以终止消化，轻轻吹打细胞使其脱落，将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。

弃去上清液，并加入1ml雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转移至冻存管内。最后将冻存细胞直接放入-80℃冰箱中保存，如需后期转入液氮罐，则需在-80℃冰箱中存放24小时以上。

c. 细胞复苏

从液氮中取出细胞冻存管（务必佩戴防护面具），快速置于37℃水浴中解冻，直至无结晶。接着用75%酒精擦拭冻存管外壁，将冻存管中的细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，再1000rpm离心5分钟。

弃去上清，沉淀后用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶，再放入37℃、5%CO₂细胞培养箱中继续培养。第二天更换为新鲜的完全培养基继续培养。

注意事项：某些细胞在运输过程中容易发生脱落，这是正常现象。如脱落较多，可将所有培养液收集至离心管中，1000rpm离心5分钟，收集上清作过渡培养。沉淀可加入胰酶1-2ml，轻轻吹打后重悬，消化1-2分钟后加入5ml完全培养基终止消化。重离心后弃去上清，加入1-2ml完全培养基重悬，最后按1:2比例进行分瓶传代，并补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5%CO₂细胞培养箱中培养。